FACULTAD DE CIENCIAS
DEPARTAMENTO DE BIOLOGÍA
LABORATORIO DE BIOLOGIA
DE PROTOZOARIOS
(L.B.P)
PROTOZOOLOGIA
Prof. Nelson López E.
CLASIFICACION ADOPTADA POR LA SOCIEDAD DE PROTOZOOLOGOS (Levine et al.,1980).
Subreino PROTOZOA
Phyllum 1 SARCOMASTIGOPHORA
Subphyllum 1 MASTIGOPHORA
Clase 2 ZOOMASTIGOPHOREA
Orden : RETORTAMONADIDA, DIPLOMONADIDA,OXYMONADIDA, TRICHOMONADIDA,
HYPERMASTIGIDA, PROTEROMONADIDA.
Introducción: Los flagelados que habitan el intestino del hombre y otros animales se encuentran en varios ordenes de los Zoomastigoforea, enunciados anteriormante. Tienen en común su capacidad para vivir y multiplicarse anaeróbicamente aún cuando difieren en: su taxonomía, su organización sub-célular y comportamiento. En el estado de trofozoito todos ellos estan equipados con: flagelos, citoesqueleto fibrilar, núcleo, retículo endoplásmico y vacuolas digestivas.
Las mitocondrías y aparato de Golgi estan ausentes en Retortamonadida y Oximonadida pero están presentes en Proteromonadida; el ciclo de vida, de estos flagelados, es sencillo y no se ha descrito ningún fenómeno sexual. Los trofozoitos se multiplican por fisión binaria típica. En ciertos grupos alternan con estados de reposo (el quíste), éste le sirve como la vía de transmisión funcional y de sobre vivencia en condiciones desfavorables.
El alimento es ingerido por fagocitosis, ocurre al azar sobre cualquier sitio de la membrana célular o en organelos espe- cializados llamados citostomas.
Los flagelados intestinales dependen de la flora asociada al intestino, tanto para su nutrición como para el ajuste de condiciones físico-químicas, virtualmente nada se conoce de su metabolísmo. Hasta hoy no se han obtenidos en medios de cultivos para hacer estudios bioquímicos, muy pocos pueden ser mantenidos en cultivos, pero, sólo, en medios indefinidos.
Las pocas especies, consideradas patógenas se encuentran dentro de los Diplomonadida. La patogenicidad ha sido, tambien señalada a muchos otros flagelados intestinales, cuya ocurrencia ha sido correlacionada con enfermedades, sin embargo un incremen-to en la población de protozoas es a menudo consecuencia de una condición patológica de otra etiología, indicando solo que la biocenosis intestinal está fuera de balance. Quizas algunos flagelados no patógenos pueden causar síntomas al primer encuen-tro con un huesped suceptible pero no es usual, hasta que la relación parásito hospedador ha alcanzado un equilibrio, así la mayoría de los flagelados son comensales. Los flagelados intes-tinales pasan al hospedador por medio del agua y por el alimento contaminado, dependiendo de la especie de parásito, los huepedes son infectados o por los trofozoitos o por quístes o ambos. El establecimiento de una infección es influenciado por la dieta del huesped.
Los flagelados intestinales, al
igual que otros organismos que lo habitan, ocupan preferentemente ciertas
regiones del intestino. Muchos habitan el ciego de aves y mamiferos, donde
la digesti'on no ocurre o es pequeña; en la ampolla cloacal de anfibios
y reptiles. Unas pocas especies prefieren la parte superior del intestino
(ej: Giardia y algunos otros diplomonadidas). Se conoce poco sobre
los factores que determinan la preferencia por ciertos lugares del intestino
para cada parásito en particular. Aparentemente (Red,1972) en un
contexto general, el gradiente de condiciones Físicas y Químicas
que se encuentran a todo lo largo del intestino son de gran importancia.
Estos gradientes resultan de las funciones propias del intestino: digesti'on,
absorción, secreci'on de materiales org'anicos por glandulas del
intestino, la actividad bioqu'imica de la flora normal del intestino.
El diagn'ostico de Laboratorio se hace con muestras de heces o el contenido intestinal. Para algunas es necesario fijarlas y teñirlas (Honigberg & Daveport, 1954) con protargal despu'es de fijaci'on en picroformol cuprice de Hollande para flagelados. El cultivo, como di'agnostico, se usa para Retortamonadida, Enteromonadida y en Polimastigida.
Diplomonadidae Giardia lamblia
Enfermedad : Giardiasis.
agente etiol'ogico en el hombre: Giardia intestinales, y
otras especies seg'un el an'mal:Ch'inchilla, perro, gato, oveja, conejos,
acure.
Los flagelados de g'enero Giardia representan el grupo m'as desarrollado de los par'asitos Diplomonadidae de la familia Hexamitidae. Difieren de los otros diplomonadiae en la presencia de un disco adhesivo, un organela de fijacig'on al sustrato, situado sobre la superficie ventral (aplanada) de su cuerpo. Todos los miembros del g'enero son par'sitos de vertebrados uno de ellos la Giardia intestinales, es del hombre. Las especies humanas y probablemente algunas especies de otros animales son pat'ogenas y causan una enfermedad llamada giardisis (lambliasis) que produse diarreas. No habia sido cultivada in vitro hasta recientemente y aislarlas ax'enicamente es un procedimiento tedioso, por ésto no hay informaci'on sobre la bioqu'imica y estructura antig'enica de Giardia.
Se ha progresado ultimamente sobre la Ultraestuctura y la patogenicidad del par'asito.
Morfolog'ia y Ciclo de Vida:
1.- Trofozoitos: Al microscopio de luz se observa piriforme, son
redondos en unos de su extremos, punteagudas hacia el extremo opuesto y
convexa dorsalmente. Una gran parte de su superficie ventral est'a modificada,
dando la apariencia de un disco adhesivo, formando una c'amara ventral
concava; posee dos n'ucleos ovales (Feulgen positivo).
Los flagelos se originan en el Complejo Kinetosomal (centriolos y otros
anexos) situado en la l'inea media entre los dos n'ucleos, de los ocho
flagelos dos emergen ventralmente, dos anterolateral, dos posterolateral
y dos caudalmente. Un par de cuerpos medios que se tiñen con hematoxilina,
siendo su apariencia caracter'istica de los principales grupos morfol'ogicos
del gen'ero.
Ultaestructura: Se refiere al estudiante al tomo II de Parasitic Protozoa, por KREIER pag. 70 y siguientes.
Ultraestructura de los Kinetosomas, Axonema y Flagelos: Como se dijo
ya, se originan de ocho kinetosomas (cuerpos basales o centriolos) ochos
flagelos, arreglados en dos grupos de cuatro kinetosomas por lado y estan
unidos en la l'inea media formando el complejo kinetosomal (extremos anteriores
del n'ucleo). los cuatro pares de flagelos poseen relativamente gran porci'on
intracitoplasmica del axonema no unido a membranas.
Quistes:
Los qu'istes de Giarda son cuerpos ovales rodeados por una pared
homog'enea de 0,3-0,5 ?m de grueso, unida a la membrana celular;
en el interior se encuentran dos o cuatro n'ucleos, Kinetosomas, Axonemas,
Flagelos, etc.
Reproducci'on y ciclo de vida:
Divisi'on: Giardia se multiplica por divisi'on binaria tanto en el estado
trofozoito como en el de qu'iste. La divisi'on nuclear coserva la integridad
de la membrana nuclear, se duplican los cuerpos basal (Kinetosomas) los
cuales se agregan cerca al polo nuclear, actuando como los centros de divisi'on.
Poseen pocos cromosmas, se han observado cuatro o seis. en este proceso
el n'cleo prof'asico migra a la mitad del cuerpo y se divide dorsoventralmente.
Los n'ucleos hermanos se separan lateralmente, siendo seguidos por las
organelas mastigontes. Cada kariomastigonte hermano recive un axonema de
cada par de la madre. Los cuerpos medios y el disco adhesivo de la c'elula
parental desaparecen. El mastigonte hermano es completado y dos nuevos
discos adhesivos se forman en la parte anterior de la c'elula madre. Los
trofozoitos hermanos se separan finalmente en un plano sagital, comenzando
por el extremo anterior.
Ciclo de Vida: Los trofozoitos viven en la regi'on duodenal y jeju- nal del intestino delgado y se pegan al epitelio, se dividen por fisi'on binaria luego pasan a la parte posterior del intestino grueso y se enqu'istan pasando luego al exterior con las heces. Un nuevo huesped es infestado al ingerir los qu'istes.
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TRICOMONADIDAE:
Las tricomonas viven en cavidades del hombre, Tricomo-na tenas en la boca;
Pentatricomona homines, Chilomatix mesnili, Enteromonas homonis y Retortamonas
intestinales, en el intestino; Tricomonas vaginalis en la vagina de la
mujer o en la uretra y gl'andula prost'atica del hombre
Tricomona vaginalis:
De las tres especies que parasitan a hombre, Tricomona vaginalis es la que tiene mayores dimensiones, variando de 10-30u de largo por 5 - 12u de ancho. La forma t'ipica es alergada, ovoide o piriforme, provista de cuatro flagelos que se dirigen como un penacho hacia el frente y un quinto flagelo adosado a una membrana ondulante. Cad flagelo tiene su cuerpo basal. De estos mismos se desprenden estructura fibrilar que recorren en menor o mayor longi-tud el interior del citoplasma: a) El axostilo es una cinta constituida por la yustaposici'on de microt'ubulos (de 20?m de di'ametro cada uno), recorre todo el cuerpo c'elular saliendo por el extremo posterior. En la parte anterior se continua por yustaposici'on con otra formaci'on de igual estructura (pelta o escudo). b) La costa, recorre la base de la membrana ondulante posee redes estructurales. c) cuerpo parabasale (aparato de Golgi).
Fisolog'ia: T. vaginales vive habitualmente sobre la mucosa de la vagina,
pudiendose observar en tres sitios de los genitales. En el hombre se ha
encontrado en el prepusio, en la uretra y en la prostata.
Crece en medios artificiales
complejos, a temperaturas entre 25 y 40 grados centigrados. La fuente de
energia utilizada son: Glucosa, fructosa, maltosa, glicogeno y almid'on.
Se reproducen por divisi'on binaria longitudinal, no se conocen formas
sexuales.
No esta claro el mecanismo de transmisi'on, parece ser por el coito. Diagn'ostico
por el examen directo, con soluci'on salina.
Tratamiento: Con drogas del grupo de nitrocimidazol, o metronida-zol.
Tricomonas tenas: Es parecida a vaginlis pero m'as pequeña, se encuentra parasitando en la boca de donde se transmite, entre otras v'ias, por la tos.
Orden Retortamonadida Familia Retortamonadidae .
Retortamona intestinalis: Este par'asito flagelado causa da|o en el hombre, parecido a Chilomatix, posee un cistostoma, pero tiene dos flagelo anteriores: uno extendido y el otro posado hacia atras, atraves del citostoma y luego arrastrado por el cuerpo. Otros miembros del gen'ero han sido encontrados en insectos.
Orden Hypermastigida: Estos protozoa poseen muchos flagelos y po- seen
tambi'en muchos cuerpos parabasales y axostilos. Hay un solo n'ucleo y
no posee citostoma, todas las especies se encuentran en el tracto alimentario
de termites, cucarachas.
Son un clasico ejemplo de mutualismo, la cooperación entre termites
y su fauna de protozoarios del intestino. Estos insectos ingieren madera
pero no poseen la enzima celulasa para degradarla, si no estan infectados
con estos protozoarios que si poseen la enzima, mueren. Los protozoario
con la enzima digieren la madera (celulosa)
produciendo asi los monosacaridos, alimento de los termites.